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  • HPLC法测定益肾胶囊中马钱苷的含量

    来源:www.shuoshisheng.net 发布时间:2019-10-25

    益肾胶囊的原始标准已包含在苏药体系的质量标准中,并由止母,猪肉,丹参,黄柏,生地和白花蛇舌草等14种中药组成。功能主治:排毒,活血,养阴清热。用途:对于肾炎,肾病综合征是一种阴虚内热型,拮抗激素引起的阴虚内热型。蛤肉是山楂植物山茱Corn(Corus officinalis Sieb.et Zuce)的成熟果实,其有效成分是loganin。高效液相色谱法测定了益肾胶囊中肉类成分的含量,提高了制剂的质量标准。该方法简便,快速,稳定且可重复。

    1仪器和试剂

    1.1仪器

    Agilent 1260高效液相色谱仪,G1314B VWD检测器(美国安捷伦); METTLEDO TOLEDO电子天平(梅特勒);紫光分光光度计(日本岛津市)。

    1.2测试药物

    氧化磷在减压下干燥12小时;乙腈色谱纯。水是纯净水;益肾胶囊(镇江市丹徒区中医院;批号:)

    2种实验方法

    2.1色谱条件

    色谱柱:Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(14: 86),检测波长238nm,色谱柱温度: 30°C,流速:1.0mL/min,进样量: 10μl,理论塔板数为4168。

    2.2溶液的制备

    称量10.42mg马葡萄糖苷的对照品,放入100ml容量瓶中,加80%甲醇摇匀使其溶解,加80%甲醇稀释至刻度,摇匀,制成参考原液(包括马在1毫升溶液中)糖苷103.37微克)。然后精确测量2ml的储备溶液,将其放入10ml的容量瓶中,加入80%甲醇稀释至刻度,即摇匀。取10片本产品,准确称量4.2752g,混合,细磨,称取1.0232g测试样品,置于20ml容量瓶中,加入约15ml 80%甲醇,超声处理(功率250W,频率40KHZ)30分钟,让其冷却,用80%甲醇溶液标记,摇匀,过滤,然后继续过滤。

    2.3标准曲线

    在10 ml容量瓶中准确取0.5 ml,1 ml,2 ml,3 ml,4 ml,5 ml的loganin参考储备液,加入80%甲醇稀释至一定体积,摇匀,并在上述色谱下取样条件。以浓度(x)为横坐标,以峰面积(y)为纵坐标进行分析,绘制标准曲线,回归方程为y=10.36x-0。 (R = 0.9999),线性范围为5.1751.68μg/ml,结果表明线性关系良好。

    2.4重复性

    根据样品含量测定方法准确称量样品的批号并取样。计算出loganin的量,平均含量为0.12mg /颗粒,RSD为0.5%。

    2.5精度确定

    取loganin参考溶液,每次注射6次,每次10μl,并记录峰面积,相对平均偏差(RSD)为0.8%。

    2.6稳定性

    取适量的测试溶液,并在室温下放置12小时。在该试验的条件下,每2小时注入10μl,并记录峰面积。计算结果是RSD为0.9%。结果表明,该方法具有良好的稳定性,测试溶液在12小时内稳定。

    2.7恢复率

    取6份已知含量的益肾胶囊(批号)样品,准确称取产品内容物0.5g,放入20ml容量瓶中,然后准确加入1ml,1ml,1.5的loganin参考储备液。根据样品溶液的制备,分别为1.5ml,1.8ml,1.8ml的M1,并测定了loganin的量,平均回收率为99.88%,RSD为0.4%。

    2.8阴性测试

    根据处方比例,称量除肉类以外的其他成分,并根据制备过程制备阴性溶液,并通过样品测定法测定,在主要成分的峰处无干扰。

    2.9样品测定

    取参比溶液和样品溶液,分别注入10μl,按照上述测量方法进行测量,读取峰面积值,并计算出结果。

    3讨论

    3.1在测试溶液的制备方法中,我们比较了超声提取,回流提取,索氏提取等方法。结果表明,超声提取是完全的。提取时间分别为20分钟,30分钟,40分钟,60分。分钟,超声提取时间比较显示30分钟,40分钟和60分钟的提取效率相同,而20分钟提取未完成,因此实验确定超声提取时间为30分钟。

    3.2该方法简便,快速,分离效果好。测定结果科学,公正,准确,可靠,可作为制剂的质量控制指标之一。

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