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  • APOC1基因rs4420638对广西红水河流域长寿人群血脂水平的影响分析

    来源:www.shuoshisheng.net 发布时间:2019-10-04

    载脂蛋白的基本功能包括运输脂质、激活脂蛋白代谢酶和识别受体。apoc1基因主要表达于肝脏,少量表达于肺、皮肤、睾丸和脾脏。rs多态性是位于19号染色体长臂(a>;g)上的apoe/c1/c4/c2基因簇中的一个常见变异,与血脂水平、慢性炎症、冠心病等心脑血管疾病密切相关。为了了解这一多态性在脂质代谢中的作用及其对长寿的可能影响,本研究对广西红水河流域长寿人群进行rs分型,并分析其与血脂水平的相关性。

    1对象和方法

    1.1研究对象

    长寿组496例,90岁以上,祖籍广西红水河流域(巴马、凤山、东兰、段);儿童组723例,年龄60-75岁,为长寿家庭或妇女;对照组611例,年龄60-75岁,为当地健康老人。实地调查于2009年3月至9月进行。

    1.2方法

    1.2.1收集空腹血液样本提取8毫升静脉血,其中5毫升用于分离血清并测定血脂,其余血液用于提取DNA。

    1.2.2酶法测定血清TC和TG,酶联免疫吸附法测定HDL-C和LDL-C。

    1.2.3基因分型rs位点通过荧光多重酶连接法(iMLDR)进行基因分型。引物:F:5'-ACTCCTCACAAGCCCTCCAATG-3',R:5'-CAGCCCCTCATCTCGGGTAGA-3'。 PCR反应体系为10μL,包含1x缓冲液(Takara),3.0 mmol/LMg 2 +,0.3 mmol/L dNTP,1 UTaq聚合酶(Qiagen Inc。),1μLDNA和1μLPCR引物(浓缩:1μmol/L)。反应条件:(94°C 20 s,65°C 40 s,72°C 1 min 30 s)×11个循环; (94°C持续20 s,59°C持续30 s,72°C持续1分钟30)×24个循环。向PCR产物中加入1USAP酶和1UEx核酸酶I酶,将混合物在37°C下孵育1小时,然后在75°C灭活15分钟以进行多重PCR产物纯化。连接反应完成后,在ABI3730XL测序仪上进行测序以确定基因型结果。

    1.3统计方法

    采用SPSS16.0统计软件分析,使用拟合优度χ2检验进行Hardy-Weinberg平衡;测量数据的正态分布以x±s表示,各组之间的比较采用协方差分析;测量数据的非正态分布中位数(四分位数范围)即M(IQR),使用秩和检验进行组间比较;卡方检验用于组间比较。采用多元线性回归(逐步法)分析脂质水平和基因型。 (AA=1,AG=2),年龄,性别(男=1,女=2),SBP,DBP,PP,BMI和FBG相关。

    2个结果

    2.1APOC1RS基因型和等位基因频率仅在AA和AG基因型中检测到,但未发现纯合突变型GG。三组间基因型和等位基因频率无差异。

    2.2载脂蛋白C1基因RS多态性对血脂水平的影响各组及对照组G等位基因携带者的TC、LDL-C水平均高于非G等位基因携带者(均P<;0.05)。性别分层后,一般人群和长寿组女性g携带者的tc和ldl-c水平高于非g携带者(p<;0.01,p<;0.05),而男性g携带者的tc水平高于非g携带者,而女性g携带者的ldl-c水平高于非g携带者。对照组高于非g携带者。儿童组男女基因型血脂水平差异无显著性。

    2.3在一般人群中,正常亚组G等位基因携带者的TC和TG水平高于非G等位基因携带者(P=0.008和P=0.046),血脂异常亚组G携带者的LDL-C水平高于非G携带者(P=0.006)。长寿组与对照组g携带者与非g携带者血脂水平无显著性差异,但g携带者ldl-c水平高于非g携带者(p=0.033)。

    2.4载脂蛋白C1基因与一般人群及对照组血脂水平的多元线性回归分析,TC、LDL-C水平与载脂蛋白C1基因RS基因型呈正相关,即AG基因型频率越高,tc、ldl-c水平:hdl-c水平越高,与apoc1基因型呈负相关,而与对照组呈正相关;tg水平与各基因型均无相关性。此外,一般人群和各组的tc、tg和ldl-c水平与性别、dbp、bmi和fpg呈正相关,与年龄呈负相关;hdl-c水平与dbp和年龄呈负相关。体重指数,空腹血糖,负相关。

    3讨论

    研究表明,广西红水河流域壮族人群rsg等位基因频率约为0.09,略低于华东地区汉族人群(0.12)。一般人群和对照组g携带者tc和ldl-c水平均显著高于非g携带者。线性回归分析也支持该变异与tc和ldl-c之间的相关性,表明该变异对脂质代谢有不良影响,与其他东亚人群的结果相似。目前认为apoc1可能通过以下途径影响血脂水平:(1)抑制肝脏tg受体,降低高tg脂蛋白的摄取,导致tg过度转化为ldl-c;(2)激活β-卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lcat)。提高ldl-c水平;(3)抑制胆固醇酯转移蛋白(cetp)活性,降低胆固醇酯。转化为低密度脂蛋白。因此,结合其他学者的研究,推测apoc1在rs位点突变时,上述过程会发生改变,如apoc1活性降低,cetp抑制降低,ldl升高,肝tg受体释放等。肝脏摄取甘油三酯的增加,以及其他转化为低密度脂蛋白的途径。令人费解的是,在长寿组的女性中,G携带者也呈现出类似的趋势。可能的解释是长寿人群性别比例的差异(女性多于男性)和G携带者的数量较多。此外,性别分层后,女性组血脂水平普遍高于男性组,说明血脂水平受性别影响较大。据报道,女性的血脂水平在一生中都会受到激素变化的影响,尤其是绝经后。至于其他人群或亚群中的g携带者,他们没有表现出高血脂水平,也没有排除其他未知的缓冲基因以抵消g突变的不利影响。

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